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液相色譜儀一般由溶劑輸送系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)（色譜柱）、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理與記錄系統(tǒng)組成，具體包括儲液器、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀或數(shù)據(jù)工作站等幾部分[1]。其中輸液泵、色譜柱和檢測器是HPLC儀的關(guān)鍵部分。

液相色譜儀結(jié)構(gòu)

1.溶劑輸送系統(tǒng)

儲液器：用來貯存數(shù)量足夠、符合要求的流動相。配有溶劑過濾器，以防止流動相中的顆粒進(jìn)入泵內(nèi)。

脫氣器：脫氣的目的是為了防止流動相從色譜柱內(nèi)流出時釋放出氣泡進(jìn)入檢測器，從而引起噪聲，不能正常檢測。

輸液泵：將儲液器中的流動相連續(xù)不斷地以高壓形式進(jìn)入液路系統(tǒng)，使樣品在色譜柱中完成分離過程。

梯度洗脫裝置：是在分離過程中通過逐漸改變流動相的組成增加洗脫能力的一種裝置。

2.進(jìn)樣系統(tǒng)

進(jìn)樣器：是將樣品送入色譜柱的裝置，進(jìn)樣方式可以分為兩種：閥進(jìn)樣或自動進(jìn)樣。比較常用的是采用自動進(jìn)樣器裝樣。

3.分離系統(tǒng)

色譜柱：對樣品進(jìn)行分離，是整個色譜系統(tǒng)的心臟，它的質(zhì)量優(yōu)劣直接影響到分離的效果。

4.檢測系統(tǒng)

檢測器：將色譜柱連續(xù)流出的樣品組分轉(zhuǎn)變成易于測量的電信號，被數(shù)據(jù)系統(tǒng)接收，得到樣品分離的色譜圖。

5.數(shù)據(jù)處理和記錄系統(tǒng)

對色譜數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，并參與HPLC儀器的自動控制

液相色譜儀發(fā)展歷史

1960年代，由于氣相色譜對高沸點(diǎn)有機(jī)物分析的局限性，為了分離蛋白質(zhì)、核酸等不易氣化的大分子物質(zhì)，氣相色譜的理論和方法被重新引入經(jīng)典液相色譜。1960年代末科克蘭（Kirkland）、哈伯、荷瓦斯（Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發(fā)了世界上臺液相色譜儀，開啟了液相色譜的時代。液相色譜使用粒徑更細(xì)的固定相填充色譜柱，提高色譜柱的塔板數(shù)，以高壓驅(qū)動流動相，使得經(jīng)典液相色譜需要數(shù)日乃至數(shù)月完成的分離工作得以在幾個小時甚至幾十分鐘內(nèi)完成。

1971年科克蘭等人出版了《液相色譜的現(xiàn)代實(shí)踐》一書，標(biāo)志著液相色譜法(HPLC）正式建立。在此后的時間里，液相色譜成為為常用的分離和檢測手段，在有機(jī)化學(xué)、生物化學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥物開發(fā)與檢測、化工、食品科學(xué)、環(huán)境監(jiān)測、商檢和法檢等方面都有廣泛的應(yīng)用。液相色譜同時還極大的刺激了固定相材料、檢測技術(shù)、數(shù)據(jù)處理技術(shù)以及色譜理論的發(fā)展。

1960年代前，使用的填充粒大于100μm，提高柱效面臨著困境，后來的研究人員便采用微粒固定相來突破著一瓶頸。