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液相色譜儀操作步驟及注意事項

2019-05-15

隨著液相色譜儀在醫(yī)院的廣泛應(yīng)用一些新手應(yīng)該對于液相色譜儀操作步驟及注意事項不太了解，所以我們?nèi)鹞鲂【帪榇蠹覝?zhǔn)備介紹一下液相色譜儀操作步驟及注意事項大家感興趣的話可以了解一下。

液相色譜儀操作步驟

1、開機操作：

（1）、打開電源，用Harb相連接時，注意Harb電源，打開計算機，打開Bootp Server（一般啟動時已打開）；

（2）、自上而下打開個組件電源，Bootp Server里顯示有信號時（有六行字符），打開工作站（先打開On line）；

（3）、打開沖洗泵頭的10％異丙醇溶液的開關(guān)（需用針捅抽），控制流量大小，以能流出的小流量為準(zhǔn)；

（4）、注意各流動相所剩溶液的容積設(shè)定，若設(shè)定的容積低于低限會自動停泵，注意洗泵溶液的體積，及時加液；

（5）、使用過程中要經(jīng)常觀察儀器工作狀態(tài)，及時正確處理各種突發(fā)事件。

2、先以所用流動相沖洗系統(tǒng)一定時間（如所用流動相為含鹽流動相，必須先用水沖洗20分鐘以上再換上含鹽流動相），正式進樣分析前30min左右開啟D燈或W燈，以延長燈的使用壽命；

3、建立色譜操作方法，注意保存為自己命名的Method，勿覆蓋或刪除他人的方法及實驗結(jié)果；

4、使用手動進樣器進樣時，在進樣前和進樣后都需用洗針液洗凈進樣針筒，洗針液一般選擇與樣品液一致的溶劑，進樣前必須用樣品液清洗進樣針筒3遍以上，并排除針筒中的氣泡；

5、溶劑瓶中的沙芯過濾頭容易破碎，在更換流動相時注意保護，當(dāng)發(fā)現(xiàn)過濾頭變臟或長菌時，不可用超聲洗滌，可用5%稀硝酸溶液浸泡后再洗滌；

6、實驗結(jié)束后，一般先用水或低濃度甲醇水溶液沖洗整個管路30分鐘以上，再用甲醇沖洗。沖洗過程中關(guān)閉D燈、W燈；

7、關(guān)機時，先關(guān)閉泵、檢測器等，再關(guān)閉工作站，然后關(guān)機，后自下而上關(guān)閉色譜儀各組件，關(guān)閉洗泵溶液的開關(guān)；

8、使用者須認(rèn)真履行儀器使用登記制度，不要擅自拆卸儀器。

液相色譜儀操作注意事項

流動相必須用HPLC級的試劑，使用前過濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)(使用0.45um或更細的膜過濾)。

流動相過濾后要用超聲波脫氣，脫氣后應(yīng)該恢復(fù)到室溫后使用。

不能用純乙腈作為流動相，這樣會使單向閥粘住而導(dǎo)致泵不進液。

使用緩沖溶液時，做完樣品后應(yīng)立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時，然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上，以充分洗去離子。對于柱塞桿外部，做完樣品后也必須用去離子水沖洗20ml以上。

長時間不用儀器，應(yīng)該將柱子取下用堵頭封好保存，注意不能用純水保存柱子，而應(yīng)該用有機相(如甲醇等)，因為純水易長霉。

每次做完樣品后應(yīng)該用溶解樣品的溶劑清洗進樣器。

C18柱不能進蛋白樣品，血樣、生物樣品。

堵塞導(dǎo)致壓力太大，按預(yù)柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查并清洗。清洗方法；①以異丙醇作溶劑沖洗：②放在異丙醇中間用超聲波清洗；⑧用10％稀硝酸清洗。

氣泡會致使壓力不穩(wěn)，重現(xiàn)性差，所以在使用過程中要盡量避免產(chǎn)生氣泡。

如果進液管內(nèi)不進液體時，要使用注射器吸液：通常在輸液前要進行流動相的清洗。

要注意柱子的pH值范圍，不得注射強酸強堿的樣品，特別是堿性樣品。

更換流動相時應(yīng)該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動邊靖洗，然后插入新的流動相中。更換無互溶性的流動相時要用異丙醇過渡一下。

有了以上關(guān)于液相色譜儀操作步驟及注意事項的介紹，相信大家也對其有了更多的認(rèn)識，也更加了解到它的重要性，如果您要了解更多請咨詢我們。