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液相色譜在實(shí)驗(yàn)之前需要做哪些準(zhǔn)備工作

2019-04-25

隨著現(xiàn)代化社會(huì)的不斷進(jìn)步和需求,科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展和提升,各種高產(chǎn)品及技術(shù)如春雨后竹筍般蓬勃發(fā)展。液相色譜產(chǎn)品及液相色譜技術(shù)就是為了適應(yīng)和滿足這種社會(huì)需要悄然而生,并逐漸成長(zhǎng)發(fā)展直至壯大起來(lái),那么大家知道液相色譜儀在使用之前需要做哪些準(zhǔn)備工作呢?下面我們?nèi)鹞鲂【幘蜑榇蠹医獯鹨幌隆?/p>

作為先進(jìn)、精密的儀器,液相色譜儀是用于的科學(xué)研究,用于復(fù)雜的化學(xué)分析,用于關(guān)于民生問(wèn)題的監(jiān)測(cè)、檢測(cè)等。儀器的正常運(yùn)行,準(zhǔn)確的結(jié)果數(shù)據(jù)是每個(gè)操作者所期待并向往的。那么儀器的正確使用和正確維護(hù)就顯得尤為重要。

實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作

1.過(guò)濾流動(dòng)相。為了保證流動(dòng)相潔凈,流動(dòng)相使用前都必須微膜過(guò)濾。

2.流動(dòng)相脫氣。為了避免流動(dòng)相中氣泡對(duì)儀器(氣泡可能會(huì)對(duì)儀器及相關(guān)設(shè)備的正常使用及壽命產(chǎn)生一定影響)及分析結(jié)果的影響。

3.運(yùn)行液相泵前盡量先清洗泵柱塞部件。清洗液一般采用10%甲醇溶液,也有采用10%異丙醇溶液(5%甲醇或異丙醇等有機(jī)相溶液能避免微生物污染,但濃度不能太高,高于20%緩沖液可能會(huì)導(dǎo)致鹽結(jié)晶析出,碰到酸堿類物質(zhì)可能會(huì)有比較強(qiáng)烈的反應(yīng);另外異丙醇粘度較大,清洗能力較強(qiáng);也有采用純水清洗的,這樣如果儀器每天使用還行,如果長(zhǎng)期不用,為了防止微生物繁殖,純水還得用含有有機(jī)相的清洗液置換出去)沖洗,這是為了保護(hù)泵柱塞和密封圈等部件在泵運(yùn)行時(shí)不被結(jié)晶鹽等磨損而導(dǎo)致泵頭漏液。

4.每天運(yùn)行儀器前先排氣。一般的液相色譜儀都有排氣功能,沒(méi)有的可以不接色譜柱開(kāi)機(jī)運(yùn)行幾分鐘排氣。

5.泵運(yùn)行時(shí)盡量不采用大流量模式(主要是換流動(dòng)相或排氣泡等,流量盡量設(shè)為3.0ml/min以內(nèi),這樣更有利于保護(hù)泵柱塞桿和密封圈等部件的壽命)。

6.分析前先對(duì)色譜系統(tǒng)(整個(gè)流路)進(jìn)行沖洗及平衡,尤其是色譜柱。先用純甲醇沖洗30分鐘,再換10%甲醇水溶液沖洗30分鐘,后換含緩沖鹽或酸堿類物質(zhì)的流動(dòng)相平衡30分鐘。色譜柱如果長(zhǎng)期沒(méi)用,每一步?jīng)_洗、平衡量盡量為色譜柱柱容量20倍以上)。如果流動(dòng)相中不含緩沖鹽或酸堿類物質(zhì),純甲醇沖洗完可直接換為流動(dòng)相。使用色譜柱前知道或懷疑色譜柱中殘留有或酸堿鹽類物質(zhì),在用純甲醇沖洗前增加一步10%甲醇水溶液沖洗。

7.如果色譜柱需要控溫(升溫),要先運(yùn)行泵后再設(shè)柱溫箱溫度。

8.待儀器運(yùn)行穩(wěn)定后(基線基本走平后,這個(gè)是經(jīng)驗(yàn)值),方可進(jìn)樣。

樣品前處理

1.樣品濃度不要太大,雜質(zhì)不要太多,否則色譜柱處理起來(lái)壓力很大。

2.進(jìn)樣前樣品一定得先經(jīng)微膜(一般采用0.22um或0.45um微膜)過(guò)濾。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程中注意事項(xiàng)

1.為了避免進(jìn)樣器殘留影響,進(jìn)樣前先對(duì)進(jìn)樣器進(jìn)行清洗(這個(gè)不是必須的,但是每進(jìn)一針樣品或標(biāo)準(zhǔn)品前都清洗進(jìn)樣器和進(jìn)樣針,當(dāng)然同一樣品也可以不洗,不同樣品盡量洗),清洗順序?yàn)榧兯?、甲醇、流?dòng)相。

2.每進(jìn)一針樣品后要對(duì)系統(tǒng)進(jìn)行一次沖洗、平衡后再進(jìn)下一針樣品(等度要求不高,梯度要求相對(duì)高,主要是沖洗色譜柱中殘留的強(qiáng)保留物質(zhì))。

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