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2019-03-18
蒸發(fā)光檢測(cè)器作為通用型檢測(cè)器用于液相色譜儀、超臨界色譜(SFC)和逆流色譜中。ELSD大的*性在于能檢測(cè)不含發(fā)色團(tuán)的化合物,如:碳水化合物、脂類、聚合物、未衍生脂肪酸和氨基酸、表面活性劑、藥物,并在沒有標(biāo)準(zhǔn)品和化合物結(jié)構(gòu)參數(shù)未知的情況下檢測(cè)未知化合物。
一、蒸發(fā)光檢測(cè)器的原理
恒定流速的色譜儀(液相、逆流色譜、毛細(xì)管電泳等)洗脫液進(jìn)入檢測(cè)器后,首先被高壓氣流霧化,霧化形成的小液滴進(jìn)入蒸發(fā)室(漂移管,drifttube),流動(dòng)相及低沸點(diǎn)的組分被蒸發(fā),剩下高沸點(diǎn)組分的小液滴進(jìn)入散射池,光束穿過散射池時(shí)被散射,散射光被光電管接收形成電信號(hào),電信號(hào)通過放大電路、模數(shù)轉(zhuǎn)換電路、計(jì)算機(jī)成為色譜工作站的數(shù)字信號(hào)——色譜圖。
二、蒸發(fā)光檢測(cè)器的特點(diǎn)
1.洗脫液需要霧化,所以霧化氣流的純度和壓力會(huì)影響檢測(cè)器的信噪比。
2.流動(dòng)相要蒸發(fā)掉,a/所以不能使用不易揮發(fā)的物質(zhì)來調(diào)節(jié)流動(dòng)相的pH值。b/可以通過蒸發(fā)溫度的調(diào)節(jié)來使比被測(cè)物質(zhì)沸點(diǎn)低的組分蒸發(fā)。c/在不使被測(cè)物質(zhì)蒸發(fā)的前提下,溫度越高,流動(dòng)相蒸發(fā)越*,色譜圖基線越好、信噪比越高。d/如果被測(cè)物質(zhì)沸點(diǎn)接近或低于流動(dòng)相的蒸發(fā)溫度,則無法檢測(cè);不過,100%的水做流動(dòng)相,蒸發(fā)室溫度也才設(shè)為150攝氏度,沸點(diǎn)比水低的有機(jī)物質(zhì)*可以用氣相色譜儀進(jìn)行分離檢測(cè)了。e/由于流動(dòng)相和溶劑蒸發(fā)了,使用ELSD檢測(cè)器收集的色譜圖一般沒有溶劑峰;而且梯度洗脫沒有折光視差效應(yīng),一般不會(huì)出現(xiàn)基線漂移。
3.檢測(cè)光散射變化,所有進(jìn)入到散射池的物質(zhì)都可被檢測(cè),而且響應(yīng)值只與物質(zhì)的量(質(zhì)量)有關(guān)。
4.濃度跟峰面積不成線性,分別取自然對(duì)數(shù)后成線性。
三、蒸發(fā)光檢測(cè)器的檢測(cè)方法
(1)用惰性氣體霧化脫洗液
(2)流動(dòng)相在加熱管(漂移管)中蒸發(fā)
(3)樣品顆粒散射光后得到檢測(cè)。蒸發(fā)光散射檢測(cè)器是一種通用型的檢測(cè)器,可檢測(cè)揮發(fā)性低于流動(dòng)相的任何樣品,而不需要樣品含有發(fā)色基團(tuán)。蒸發(fā)光散射檢測(cè)器靈敏度比示差折光檢測(cè)器高,對(duì)溫度變化不敏感,基線穩(wěn)定,適合與梯度洗脫液相色譜聯(lián)用。蒸發(fā)光散射檢測(cè)器已被廣泛應(yīng)用于碳水化合物、類脂、脂肪酸和氨基酸、藥物以及聚合物等的檢測(cè)。
四、蒸發(fā)光檢測(cè)器的優(yōu)勢(shì)
ELSD的通用檢測(cè)方法消除了常見于傳統(tǒng)HPLC檢測(cè)方法中的難點(diǎn),不同于紫外和熒光檢測(cè)器,ELSD的響應(yīng)不依賴于樣品的光學(xué)特性,任何揮發(fā)性低于流動(dòng)相的樣品均能被檢測(cè),不受其官能團(tuán)的影響。ELSD的響應(yīng)值與樣品的質(zhì)量成正比,因而能用于測(cè)定樣品的純度或者檢測(cè)未知物。示差檢測(cè)器(RI)也可以說是一種通用型檢測(cè)器,但它靈敏度低,并與梯度脫洗不相容。質(zhì)譜是另一種通用型檢測(cè)器,但它的昂貴費(fèi)用和操作復(fù)雜性限制了它的應(yīng)用。ELSD的*檢測(cè)方法,對(duì)于它的多種用途和高性能至為關(guān)鍵。
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